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膠原酶I的化學(xué)本質(zhì)及使用膠原酶的化學(xué)名為膠原蛋白水解酶(Collagenase)，它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結(jié)構(gòu)，而不損傷其它蛋白質(zhì)和組織。膠原酶I的化學(xué)本質(zhì)是一種蛋白酶，它能夠特異性的結(jié)合Pro-X-Glyc-Pro序列中，中性氨基酸(X)和甘氨酸之間的肽鍵。該序列高頻率的存在于膠原中。膠原酶是*的一種可以降解廣泛存在于結(jié)締組織中的具有三股螺旋的天然膠原纖維的蛋白酶。但同時，這對溫度、PH和導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的各種因素均非常敏感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構(gòu)... 查看詳情 2015-03-09
CCK8試劑盒日本同仁常見問題解答(二) 上篇文章，我們已經(jīng)介紹了一部分CCK8試劑盒日本同仁的常見問題，本文將繼續(xù)為大家講解。1、實驗之前，是否需要先檢測一下培養(yǎng)基和CCK-8是否會反應(yīng)?建議使用一個孔作一下檢測，因為有培養(yǎng)基中可能含有氧化還原反應(yīng)的物質(zhì)，在正式實驗之前有必要先確認(rèn)培養(yǎng)基和CCK-8是否反應(yīng)。一般正常在的OD值應(yīng)該在0.4以下。2、如果加入的藥物中含有金屬，是否會有影響?金屬對CCK-8顯色有影響。當(dāng)終濃度為1Mm的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會抑制5%、15%、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級。如果終濃... 查看詳情 2015-03-02
CCK8試劑盒日本同仁常見問題解答(一) CCK8試劑盒日本同仁是常用的試劑盒之一，很多客戶在使用時都會有一些疑問，北京沃比森整理總結(jié)一些常見的問題，希望給大家一些參考和借鑒。1、一個孔中應(yīng)接種多少個細(xì)胞?當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時，貼壁細(xì)胞的zui小接種量至少為1,000個/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2,500個/孔(100μl培養(yǎng)基)。如果要使用24孔板或6孔板實驗，請先計算每孔相應(yīng)的接種量，并按照每孔培養(yǎng)基總體積的10%加入CCK-8溶液。2、CCK8試劑盒日本同仁能否... 查看詳情 2015-01-27
GelRed核酸染料的產(chǎn)品特性 GelRed核酸染料產(chǎn)品特性：1.高靈敏度GelRed和GelGreen是目前市場中zui靈敏的凝膠核酸染料2.GelRed核酸染料更安全艾姆斯氏試驗結(jié)果表明，該染料的誘變性遠(yuǎn)小于溴化乙錠(EB)3.穩(wěn)定性*可以使用微波爐加熱，可以在室溫下保存4.信噪比高樣品熒光信號強(qiáng)，背景信號低。5.GelRed核酸染料有廣泛的適應(yīng)性適用于預(yù)制凝膠和凝膠電泳后染色6.染色過程簡單與EB一樣，在預(yù)制膠和電泳過程中不必?fù)?dān)心染料降解;而電泳后染色過程也只需30分鐘且無需脫色或沖洗，即可直接用紫外... 查看詳情 2015-01-21
脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染DNA的操作過程脂質(zhì)體2000適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前條件下zui方便的轉(zhuǎn)染方法之一。轉(zhuǎn)染率高，優(yōu)于磷酸鈣法，比它高5~100倍，能把DNA和RNA轉(zhuǎn)染到各種細(xì)胞。用脂質(zhì)體2000進(jìn)行轉(zhuǎn)染時，首先需優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件，應(yīng)找出該批LR對轉(zhuǎn)染某一特定細(xì)胞適合的用量、作用時間等，對每批LR都要做：先要固定一個DNA的量和DNA/LR混合物與細(xì)胞相互作用的時間，DNA可從1~5μg和孵育時間6小時開始，按這兩個參數(shù)繪出相應(yīng)LR需用量的曲線，再選用LR和DNA兩者*的劑量，確定出轉(zhuǎn)染... 查看詳情 2015-01-13
HyClone胎牛血清培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞的兩種方法 HyClone胎牛血清培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzymedisperse)。下面一起來看下這兩種方法。1、貼塊法方法：動物經(jīng)頸動脈放血后，在無菌操作下迅速取出胸腹主動脈段，置于含Hank's液的平皿中漂洗3次，將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層，然后縱行切開血管，刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細(xì)胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層，切成約1mm寬的小條，浸泡在含血清的Hank's液中，并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱，2h左右，取出培養(yǎng)瓶加入20... 查看詳情 2015-01-06

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